EZH2的小干扰RNA真核表达载体的构建及其在膀胱癌T24细胞系稳定表达的研究

• 作者: 李俊 杨宏 毕城伟 王海峰 秦扬 胡礼炳 雷永虹 霍倩
• 来源期刊: 中国全科医学
• 关键词: EZH2 膀胱肿瘤 RNA干扰 真核载体构建
• 年，卷（期）: 2013,（33）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 3927-3929
• 页数: 3页
• 分类号: R737.14
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-9572.2013.11.081

摘要

目的 构建EZH2的小干扰RNA(siRNA2)真核表达载体质粒,获得稳定表达干扰质粒的膀胱癌细胞系,并探讨EZH2在膀胱癌中的作用.方法 通过合成特异性沉默EZH2的siRNA2片段,获得pEGFP-C1-siEZH2表达载体;脂质体介导重组质粒转染T24细胞,经G418加压筛选获得稳定转染细胞株,采用实时荧光定量PCR和免疫印迹法检测转染后细胞系T24 EZH2的表达.结果 经测序证明重组载体构建成功,稳定转染siRNA2的T24细胞EZH2的mRNA和蛋白水平均较空白对照组下降(P＜0.01).结论 成功构建EZH2的siRNA2真核表达载体,获得EZH2稳定沉默的T24细胞系,为进一步研究以EZH2为靶点的膀胱癌基因治疗奠定实验基础.