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稳定过表达环状RNA circ-Fam114a2膀胱癌T24细胞株的建立
稳定过表达环状RNA circ-Fam114a2膀胱癌T24细胞株的建立
作者:
于浩
卢泓成
吕强
周锐
李鹏超
杨潇
王敬梓
韩杰
原文服务方:
现代泌尿外科杂志
circ-Fam114a2
环状RNA
转染
膀胱癌
摘要:
目的 利用慢病毒载体建立稳定过表达环状RNA circ-Fam114a2的膀胱癌T24细胞株.方法 利用pLVX-CMV-mini-crRNA-EF1 GFP-Puro质粒,制备慢转录病毒pLVX-CMV-minicrRNA-EF1-GFP-Puro-circ-Fam114a2 (circ-Fam114a2)和pLVX-CMV-minicrRNA-EF1-GFP-Puro-Vector(Vector),并转染膀胱癌T24细胞系.用嘌呤霉素筛选阳性表达细胞,并用荧光显微镜,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和Northern印记等实验验证circ-Fam114a2基因成环及过表达情况.最后,通过CCK-8实验和克隆形成实验初步探究circ-Fam114a2对T24细胞增殖的影响.结果 转染并用嘌呤霉素药筛后的T24细胞在荧光显微镜下呈现出绿色荧光.qRT PCR显示过表达组细胞circ-Fam114a2水平是对照组的28倍,而Fam114a2 mRNA没有明显变化.Northern印迹显示circ-Fam114a2在T24细胞中成功成环并过表达.CCK-8实验和克隆形成实验表明过表达circ-Fam114a2显著抑制T24细胞增殖.结论 该实验成功建立了稳定高表达circ-Fam114a2的膀胱癌T24细胞模型,并初步探究circ-Fam114a2对膀胱癌细胞的增殖抑制作用.为进一步研究circ-Fam114a2在膀胱癌中的作用和机制奠定了基础.
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篇名
稳定过表达环状RNA circ-Fam114a2膀胱癌T24细胞株的建立
来源期刊
现代泌尿外科杂志
学科
关键词
circ-Fam114a2
环状RNA
转染
膀胱癌
年,卷(期)
2019,(6)
所属期刊栏目
基础研究
研究方向
页码范围
474-479
页数
6页
分类号
R737.14
字数
语种
中文
DOI
10.3969/j.issn.1009-8291.2019.06.014
五维指标
传播情况
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circ-Fam114a2
环状RNA
转染
膀胱癌
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研究去脉
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期刊影响力
现代泌尿外科杂志
主办单位:
西安交通大学
出版周期:
月刊
ISSN:
1009-8291
CN:
61-1374/R
开本:
大16开
出版地:
邮发代号:
创刊时间:
1996-01-01
语种:
chi
出版文献量(篇)
5005
总下载数(次)
0
总被引数(次)
19249
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国家自然科学基金
英文译名:
the National Natural Science Foundation of China
官方网址:
http://www.nsfc.gov.cn/
项目类型:
青年科学基金项目(面上项目)
学科类型:
数理科学
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