端粒酶抑制因子PinX1基因在鼻咽癌细胞中的表达及作用效应分析

• 作者: 文忠 申聪香 赖肖芬 钱宇虹
• 来源期刊: 中国耳鼻咽喉颅底外科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 鼻咽癌 PinX1基因 小干扰RNA 端粒酶 凋亡
• 年，卷（期）: 2011,（3）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 161-166
• 页数: 6页
• 分类号: R739.63
• 语种: 中文

摘要

目的 探讨PinX 1基因在鼻咽癌细胞中的表达及其作用效应分析.方法 构建包含全长人PinX 1基因序列的质粒载体pEGFP-C 3-PinX 1及Pinx 1的小干扰RNA,PinX1-FAMsiRNA.脂质体法转染人鼻咽癌5～8F细胞,采用RT-PCR检测PinX 1基因和端粒酶催化亚单位( hTERT) mRNA的表达;分别采用Stretch PCR 、MTT及流式细胞仪检测肿瘤细胞端粒酶活性、增殖能力及凋亡改变.结果 成功构建PinX 1基因质粒载体及合成其小干扰RNA.转染鼻咽癌5～8F细胞后,PinX 1 mRNA的表达水平显著提高,hTERT mRNA的表达水平下降了29.9%,端粒酶活性显著降低,肿瘤细胞增殖能力受到抑制,诱导鼻咽癌细胞凋亡率从未转染的19.27%0.76%增加至转染后的49.73% 12.70%( P <0.05);转染PinX 1基因的小干扰RNA(PinX 1FAM-siRNA ),结果显示PinX 1 mRNA的表达水平下降70%,而鼻咽癌5-8F细胞的增殖能力、端粒酶活性和hTERT的表达以及细胞凋亡率未受到显著影响.结论 外源PinX 1基因可在鼻咽癌细胞中高表达,显著抑制该肿瘤细胞中端粒酶活性及其hTERT mRNA表达,抑制鼻咽癌细胞增殖并诱导肿瘤细胞凋亡增加.沉默鼻咽癌细胞中PinX 1基因后,Pinx 1基因的抑制性功能相应地受抑制.施加正反调节因素后的结果表明Pinx 1基因是一个潜在的端粒酶活性抑制剂,可能通过靶向抑制端粒酶途径来影响肿瘤的发生发展,本研究将为鼻咽癌的靶向基因治疗开辟新领域.