人羊水来源干细胞以类胚体样结构形式向心肌样细胞分化的可行性

• 作者: 周君梅 尚亚峰 张胜利 王雪 谢华 陈方 马晓荣 高同斌
• 来源期刊: 中华医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 干细胞 类胚体 心肌细胞 分化
• 年，卷（期）: 2011,（46）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 3293-3297
• 分类号: R4
• 字数: 4129字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0376-2491.2011.46.016

摘要

目的 探讨人羊水来源干细在体外以类胚体形式向心肌样细胞分化的可行性.方法 在B型超声引导下穿刺抽得孕中期羊水,体外分离、培养得到羊水来源干细胞.取第四代细胞消化计数,悬滴法培养5d后,采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)检测干细胞相关mRNA表达情况；更换诱导培养液以贴壁培养方法诱导类胚体细胞向心肌样细胞分化2周.RT-PCR、免疫荧光染色方法鉴定心肌细胞特异mRNA及蛋白的表达.结果人羊水来源干细胞体外悬滴培养后24h即可形成类胚体样结构；类胚体样结构直径随培养时间逐渐增大,第5天时,类胚体样结构平均直径为(237.3±26.7)μm,形成率为93.5％；RT-PCR检测到干细胞相关mRNA表达；类胚体形式下,经诱导后,免疫荧光染色检测类胚体中羊水来源干细胞表达心肌细胞部分表型:肌结蛋白(Desmin)、肌钙蛋白Ⅰ(TnⅠ)和横纹肌辅肌动蛋白(α-Actinin)；RT-PCR检测类胚体中羊水来源干细胞表达心肌细胞相关mRNA:肌结蛋白(Desmin)、肌动蛋白(α-Actin)、肌钙蛋白I(TnⅠ)、肌钙蛋白T(Tn T)、T-box、NK2.5.而对照组呈阴性.结论人羊水来源干细胞体外悬滴培养后可形成形态均一的类胚体样结构.5-氮杂脱氧胞苷(5-Aza)能诱导类胚体样结构中的羊水来源干细胞向心肌样细胞分化.