非洲爪蟾驱动蛋白样蛋白2靶蛋白C'末端SBP-3×Flag标记的HCT116结直肠癌细胞模型的建立

• 作者: 张晓东 张泽延 杜润蕾 王琳芳 缪时英 黄泽彬
• 来源期刊: 中国医学科学院学报
• 关键词: 非洲爪蟾驱动蛋白样蛋白2靶蛋白 基因敲入 同源重组 HCT 116 结直肠癌
• 年，卷（期）: 2011,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 624-628
• 分类号: R735.3+4
• 语种: 中文
• DOI: 10.3881/j.issn.1000-503X.2011.06.008

摘要

目的 建立非洲爪蟾驱动蛋白样蛋白2靶蛋白(TPX2)C'末端SBP-3×Flag标记的HCT 116结直肠癌细胞模型.方法 PCR扩增同源臂,构建TPX2的腺相关病毒打靶载体,包装病毒后打靶HCT 116结直肠癌细胞,G418和PCR筛选获得含有新霉素抗性基因的阳性细胞株,最后通过Cre病毒感染去除抗性基因,并用PCR方法筛选获得TPX2C'末端SBP和3×Flag内源性双标签的HCT 116结直肠癌细胞株.结果 筛选获得2个含有新霉素抗性基因的细胞株,随后经Cre病毒感染得到去除新霉素抗性基因的阳性细胞克隆,并经Western blot检测验证了SBP-3×Flag基因的敲入.结论 成功建立了TPX2 C'末端SBP-3×Flag标记的HCT 116结直肠癌细胞模型.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	缪时英	中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室	15	26	3.0	4.0
2	王琳芳	中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室	13	9	2.0	2.0
3	张晓东	武汉大学生命科学学院细胞与发育生物学系	25	509	10.0	22.0
4	黄泽彬	中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室	1	2	1.0	1.0
5	张泽延	武汉大学生命科学学院细胞与发育生物学系	1	2	1.0	1.0