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摘要:
为了研制特异性识别人PD-L2 (B7-DC,CD273)的鼠单克隆抗体,并对其生物学特性和PD-L2分子的表达特性进行初步分析.以高表达人PD-L2分子的基因转染细胞L929/PD-L2作为免疫原,常规免疫BALB/c小鼠,采用B淋巴细胞杂交瘤技术进行细胞融合,以L929/PD-L2作为抗体筛选细胞,L929/mock为对照细胞,经间接免疫荧光标记和流式细胞术分析、反复筛选和多次克隆化培养,筛选出分泌特异性鼠抗人PD-L2单克隆抗体的杂交瘤细胞株;采用Western blot、1g亚型快速定性试纸法、间接免疫荧光法和竞争结合抑制实验对单抗进行生物学特性的分析,继而利用该单抗进行免疫荧光标记和流式细胞术检测PD-L2在肿瘤细胞株和免疫细胞上的表达特性.结果显示,通过多次融合和反复筛选,成功获得一株特异性鼠抗人PD-L2(B7-DC)的杂交瘤,该杂交瘤分泌的单克隆抗体能特异识别人PD-L2分子.继而利用上述研制获得的单克隆抗体8F2进行免疫荧光标记和流式细胞术检测发现,PD-L2上调性表达在成熟的树突状细胞和调节性T细胞上.提示,成功地获得一株特异性鼠抗人PD-L2单克隆抗体,并对其生物学特性和表达谱进行初步分析,证明其识别抗原表位不同于商品化抗体,是一株新型鼠抗人PD-L2单抗,这为进一步研究PD-1/PD-L2信号通路在免疫应答中的生物学作用提供了有价值的物质基础.
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文献信息
篇名 一株新型鼠抗人PD-L2单克隆抗体的研制及其生物学特性的鉴定
来源期刊 现代免疫学 学科 医学
关键词 协同刺激分子 单克隆抗体 PD-L2 PD-1
年,卷(期) 2011,(4) 所属期刊栏目 论著
研究方向 页码范围 275-280
页数 6页 分类号 R392.11
字数 语种 中文
DOI
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 张学光 399 1957 18.0 24.0
2 陈永井 78 388 11.0 14.0
3 周莹 19 49 5.0 5.0
4 白利雄 6 11 2.0 3.0
5 张雪琨 4 21 2.0 4.0
6 马钰 3 28 1.0 3.0
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研究主题发展历程
节点文献
协同刺激分子
单克隆抗体
PD-L2
PD-1
研究起点
研究来源
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研究去脉
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相关学者/机构
期刊影响力
现代免疫学
双月刊
1001-2478
31-1899/R
大16开
上海市重庆南路280号5号楼1103室
1981
chi
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