兔骨髓间充质干细胞的分离培养鉴定及BrdU标记的体外研究

• 作者: 李伟岸 肖仕辉 赵劲民 陆定贵 韦庆军 韦积华
• 来源期刊: 广西医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 骨髓间充质干细胞 分离 培养 诱导 5-溴脱氧尿嘧啶核苷 四甲基偶氮唑盐
• 年，卷（期）: 2011,（2）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 169-173
• 分类号: R-332
• 字数: 4713字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-930X.2011.02.002

摘要

目的:拟在体外建立一种分离纯化、培养扩增、标记兔骨髓间充质干细胞(BMSCs)的方法.方法:密度梯度离心和贴壁培养相结合,台盼蓝染色观察离心后细胞活性,绘制BMSCs生长曲线,流式细胞仪检测BMSCs表面标记.诱导传代细胞向成软骨细胞分化,2周后免疫组化检测Ⅱ型胶原的表达和阿尔新蓝染色检测蛋白多糖的表达.BrdU标记BMSCs,观察最佳标记率及标记时间,并予四甲基偶氮唑盐方法测定标记后细胞活性.结果:密度梯度离心结合贴壁法能分离培养出纯度较高的BMSCs,分离后细胞活性均大于99%,BMSCs表面标记CD90、CD45、CD34阳性细胞表达分别为99.24%、0.03%、1.37%,BMSCs的生长曲线呈S形.成软骨诱导2周后Ⅱ型胶原免疫组化阳性,阿尔新蓝染色细胞基质被蓝染.BrdU标记后,MSCs标记率>95%,BrdU细胞标记最佳时间为48 h,最佳浓度为10 mg/L,标记后细胞活性高.结论:采用密度梯度离心和贴壁培养相结合,可获得纯度较高BMSCs;BrdU是一种简单、有效的标记BMSCs的方法,BrdU对细胞标记率高.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	赵劲民	广西医科大学第一附属医院创伤骨科手外科	221	1689	20.0	30.0
2	韦庆军	广西医科大学第一附属医院创伤骨科手外科	49	216	7.0	12.0
3	韦积华	广西医科大学第一附属医院创伤骨科手外科	14	58	4.0	6.0
4	肖仕辉	广西医科大学第一附属医院创伤骨科手外科	15	57	4.0	6.0
5	李伟岸	广西医科大学第一附属医院创伤骨科手外科	9	44	3.0	6.0
6	陆定贵	广西医科大学第一附属医院创伤骨科手外科	2	2	1.0	1.0