猪流行性乙型脑炎病毒种猪精液分离株的鉴定及进化分析

• 作者: 刘力 张改平 樊剑鸣 滕蔓 王兴涛 禹斌 罗俊 鄂巍
• 来源期刊: 河南农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 流行性乙型脑炎病毒 分离鉴定 M基因 E基因 系统进化树 基因Ⅲ型
• 年，卷（期）: 2011,（5）
• 所属期刊栏目: 畜牧·兽医
• 页码范围: 152-157
• 分类号: S855.3
• 字数: 3722字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-3268.2011.05.038

摘要

利用RT-PCR技术对河南省某规模化猪场乙脑疑似病例的种猪精液进行分析,从部分样本中扩增出与流行性乙型脑炎病毒(JEV)M基因和E基因具有高度同源性的预期产物.在3日龄乳鼠脑内接种种猪精液上清,10 d左右即出现典型神经症状,并且病死鼠脑组织RT-PCR结果均为阳性.用病死鼠脑组织研磨上清接种BHK-21细胞,感染60 h后用JEV单抗进行间接免疫荧光鉴定均为阳性,这表明分离毒株均为JEV流行毒株,分别命名为BSF.ZZ-1和BSF.ZZ-3.对新分离毒株进行体外细胞培养,BSF.ZZ-1和BSF.ZZ-3连续传代3次后病毒量均获得明显增加,最高分别可达104.5±0.1TCI50/mL和104.2±0.2TCID50/mL.用生物学软件MEGA 4.0分别构建JEV基因的系统进化树,发现BSF.ZZ-1和BSF.ZZ-3处于同一进化分支,均属于基因Ⅲ型.