乙型肝炎病毒基本核心启动子区A1762T/G1764A双突变复制质粒的构建

• 作者: 张园海 徐君 李晶 申悦平
• 来源期刊: 江苏大学学报(医学版)
• 学科: 医学
• 关键词: 乙型肝炎病毒 基本核心启动子 突变 质粒
• 年，卷（期）: 2011,（3）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 224-228
• 分类号: R512.62
• 字数: 3661字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-7783.2011.03.010

摘要

目的:构建乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)基本核心启动子(base core promoter,BCP)区A1762T/G1764A双突变株的复制质粒.方法:以1.5拷贝HBV野生型全基因组序列质粒(pHBV1.5,C型)为模板,采用分子克隆、大引物PCR定点诱导突变和遗传检测法等技术,筛选出阳性克隆,提取突变质粒,经DNA测序鉴定质粒序列的正确性.将突变质粒转染到人肝癌HepG2.0细胞,测定细胞培养液HBV DNA载量和HBsAg水平来鉴定突变质粒的复制能力.结果:成功构建BCP区A1762T/G1764A双突变复制质粒,经转染人肝癌HepG2.0细胞培养后测定HBV DNA水平,双突变株复制能力高于野生株[分别为(3.29±1.27)×105拷贝/ml和(1.24±0.24)×105拷贝/ml,P =0.01].结论:获得BCP区A1762T/G1764A双突变株质粒,为进一步研究启动子转录活性等基础性研究提供了基本模型.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李晶	江苏大学附属医院风湿免疫科	62	187	6.0	8.0
2	申悦平	镇江市第三人民医院传染科	9	33	3.0	5.0
3	徐君	镇江市第三人民医院传染科	4	39	3.0	4.0
4	张园海	镇江市第三人民医院传染科	10	28	3.0	5.0