补体C5a受体拮抗剂体外筛选平台的建立

• 作者: 彭晖 李新颖 杨跃梅 王一 王会会 王立燕 石艳春 陈国江 魏化伟 黎燕
• 来源期刊: 国际药学研究杂志
• 学科: 医学
• 关键词: C5a CD88 C5a受体拮抗剂 筛选平台 PMX-53
• 年，卷（期）: 2011,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 62-67
• 分类号: R695
• 字数: 5668字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-0440.2011.01.010

摘要

目的建立稳定的补体C5a受体(C5aR)拮抗剂筛选平台.方法采集人外周静脉抗凝血,与不同浓度C5a、脂多糖及PMX-53孵育10～30min.通过流式细胞术检测中性粒细胞表面CD11b的表达,溶菌酶检测试剂盒观察中性粒细胞分泌溶菌酶的能力变化,罗丹明-123检测中性粒细胞呼吸爆发的变化,ELISA检测细胞上清液中白细胞介素(IL)-8的表达变化,Western Blotting检测胞外信号调节激酶(ERK)、蛋白激酶B(AKB或AKT)含量及其磷酸化水平的变化,考察补体C5a刺激及使用阳性药物PMX-53后对各生化指标的影响.结果 C5a刺激人外周血可增强中性粒细胞CD11b的表达,促进溶菌酶释放和IL-8的分泌,激发呼吸爆发,上调ERK、AKT的含量和磷酸化水平,阳性药物PMX-53则能显著抑制C5a的上述生物学效应.结论成功建立C5aR拮抗剂人全血体外筛选平台,为C5aR拮抗剂筛选及功能研究奠定了基础.