根癌农杆菌EHA105和LBA4404冻融法转化条件的优化研究

• 作者: 任天年 何赟绵 吴梧桐 奚涛 沈晓 王学全
• 来源期刊: 药物生物技术
• 学科: 生物学
• 关键词: 根癌农杆菌 转化率 冻融法 二甲基亚砜 聚乙二醇
• 年，卷（期）: 2011,（5）
• 所属期刊栏目: 论文
• 页码范围: 382-386
• 页数: 5页
• 分类号: Q81
• 语种: 中文

摘要

对传统的根癌农杆菌冻融法转化条件进行优化,研究了根癌农杆菌EHA105和LBA4404的菌株生长状态、CaCl2浓度、质粒加入量、二甲基亚砜(DMSO)、聚乙二醇(PEG4000)对质粒pBI121-Ctube转化根癌农杆菌EHA105和LBA4404的影响.结果表明:EHA105比LBA4404更容易接受外源质粒,两株农杆菌在Ca2+浓度为0.06 mol/L时,感受态转化能力最佳.OD600分别为0.5和0.4时,EHA105和LBA4404的转化效率较高.10 μg的pBI121-Ctube质粒会降低转化率.低浓度的DMSO和PEG4000均可以提高转化率,浓度过高会抑制农杆菌转化甚至产生毒害作用.在初步优化的感受态细胞中,添加DMSO和PEG4000(4％)的EHA105和LBA4404感受态细胞,转化率比没有DMSO和PEG4000制备的最佳农杆菌感受态细胞转化效率增加了28.6和22.3倍(P＜0.01),结果表明该法比传统的优化效果更加有效.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	奚涛		138	927	15.0	25.0
2	吴梧桐		256	2771	24.0	37.0
3	任天年		4	10	1.0	3.0
4	王学全		4	23	2.0	4.0
5	何赟绵		7	48	3.0	6.0
6	沈晓		2	0	0.0	0.0