正常人脐静脉内皮细胞的原子力显微镜观察

• 作者: 丁晖 潘运龙 覃莉 陈茜
• 来源期刊: 暨南大学学报（自然科学与医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 人脐静脉内皮细胞 原子力显微镜 形貌 机械性质
• 年，卷（期）: 2011,（2）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 194-198,208
• 分类号: R329.2+4
• 字数: 4384字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-9965.2011.02.016

摘要

目的:利用原子力显微镜(AFM)在单细胞水平分析正常人脐静脉内皮细胞的形貌特征和机械性质,为了解内皮细胞结构与功能的关系奠定基础.方法:新鲜人脐静脉内灌注质量分数为0.25%胰蛋白酶消化,获得人脐静脉内皮细胞(HUVECs),M199培养基进行培养,免疫细胞化学检测内皮细胞第Ⅷ因子的表达.将体外培养的HUVECs用质量分数为4%多聚甲醛固定,空气中干燥后用原子力显微镜进行观察.结果:HUVECs体外生长3～4d后可铺满单层,细胞呈长梭形,蛋白水平高表达第Ⅷ因子.细胞周期显示77.7%细胞处于G1期.AFM形貌图显示细胞呈长梭形,长径是45～55μm、短径是23～28μm、高度是280～400 nm.AFM分析细胞膜表面超微结构的几何参数,高低差(Rp-v)是(150.40±11.26)nm,均方根粗糙度(Rq)是(36.17±5.58)nm,平均粗糙度(Ra)是(26.80±5.54)nm,平均高度(Meant Ht)是(144.2±13.35)nm.利用AFM高空间分辨率的力位移曲线测量系统.测出细胞膜表面的黏附力约为800 pN,硬度是(1.12±0.24)mN/m.结论:AFM能对内皮细胞表面的超微结构进行成像并提供准确而客观的信息,有助于加深对内皮细胞结构与功能关系的理解.