人肠系膜动脉平滑肌sGCα和sGCβ基因表达水平检测方法的建立

• 作者: 曾晓荣 杨艳 毛亮 谭晓秋 邱妍妍
• 来源期刊: 泸州医学院学报
• 学科: 医学
• 关键词: sGCα基因 sGCβ基因 人肠系膜动脉平滑肌 实时荧光定量PCR
• 年，卷（期）: 2011,（2）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 111-115
• 分类号: R734.2
• 字数: 3215字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-2669.2011.02.001

摘要

目的:建立实时荧光定量PCR检测人肠系膜动脉平滑肌sGCα和sGCβ基因表达水平的检测方法,并构建相应质粒标准品,为进一步研究基因功能奠定基础.方法:提取人肠系膜动脉组织总RNA,采用RT-PCR方法获取sGCα、sGCβ、GAPDH基因片段,与pNID-18T vector连接,并转化到大肠杆菌DH5α细胞,通过PCR和测序鉴定重组质粒.提取含目的基因的质粒作为标准品,采用SYBR Green Ⅰ法检测人肠系膜动脉平滑肌sGCα和sGCβ基因表达和构建标准曲线.结果:人肠系膜动脉平滑肌存在sGCα和sGCβ基因表达,质粒标准品经过PCR鉴定并测序,与数据库公布的序列完全一致,标准曲线线性关系好,相关系数R2>0.99.结论:建立了稳定的定量检测方法,并成功用于检测人肠系膜动脉平滑肌sGCα和sGCβ基因表达,构建质粒标准品能用于后续实验.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨艳	泸州医学院医学电生理省部共建教育部重点实验室	184	902	14.0	21.0
2	曾晓荣	泸州医学院医学电生理省部共建教育部重点实验室	148	730	12.0	20.0
3	谭晓秋	泸州医学院医学电生理省部共建教育部重点实验室	14	60	4.0	7.0
4	毛亮	泸州医学院医学电生理省部共建教育部重点实验室	14	31	3.0	5.0
5	邱妍妍	泸州医学院医学电生理省部共建教育部重点实验室	1	2	1.0	1.0