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摘要:
目的 探讨RNA干扰技术沉默Id-1基因表达后对矽肺癌细胞株增殖能力的影响.方法 针对Id-1基因mRNA靶向设计合成短发夹RNA,构建重组pGFU6、neo质粒,重组质粒转染矽肺癌YTLMC-90细胞株.反转录聚合酶链式反应检测转染后Id-1基因的转录;免疫印迹法检测Id-1,核转录因子NF-kB/p50、NF-kB/p65,Bc1-2,Bax,环氧合酶-2,c-Myc基因,血管内皮细胞生长因子,增殖细胞核抗原,β-actin基因的表达;流式细胞术检测细胞周期的变化;3H-胸腺嘧啶核苷掺入法、四氮唑蓝法和克隆形成实验检测细胞的增殖活力.结果 重组质粒经酶切和测序鉴定,证明靶基因序列正确,质粒构建成功;反转录-聚合酶链式反应和免疫印迹法检测结果表明,矽肺癌细胞转染重组质粒后Id-1基因mRNA转录和蛋白合成都明显下降,Bc1-2、环氧合酶-2、c-Myc、增殖细胞核抗原、血管内皮细胞生长因子等与增殖相关基因表达量下降;细胞周期被阻滞在G0/G1期,S期细胞明显减少;细胞活力降低,增殖受到抑制.结论 构建的重组质粒能靶向沉默Id-1基因,并抑制YTLMC-90细胞株的增殖能力,因此Id-1基因可以作为人矽沉着病并发肺癌基因治疗的候选靶点.
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文献信息
篇名 靶向Id-1基因的RNA干扰对人矽肺癌细胞增殖的影响
来源期刊 兰州大学学报(医学版) 学科 医学
关键词 Id-1基因 RNA干扰 矽沉着病 肺癌 增殖
年,卷(期) 2011,(2) 所属期刊栏目 基础医学
研究方向 页码范围 10-14,19
页数 6页 分类号 R734.2
字数 3959字 语种 中文
DOI 10.3969/j.issn.1000-2812.2011.02.003
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 杨春蕾 四川大学生命科学学院 37 191 9.0 12.0
2 石超 四川大学生命科学学院 6 9 2.0 3.0
3 蔡哲 四川大学生命科学学院 5 4 1.0 2.0
4 裴斐 四川大学生命科学学院 3 2 1.0 1.0
5 杨超 四川大学生命科学学院 50 208 7.0 12.0
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研究主题发展历程
节点文献
Id-1基因
RNA干扰
矽沉着病
肺癌
增殖
研究起点
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研究分支
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期刊影响力
兰州大学学报(医学版)
双月刊
1000-2812
62-1194/R
16开
兰州市东岗西路199号(兰州大学医学校区)
54-61
1958
chi
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