中国水仙高分子量核DNA提取方法的建立

• 作者: 潘东明 潘腾飞 王江波 王金英 郭志雄 钟娴
• 来源期刊: 热带作物学报
• 学科: 农学
• 关键词: 中国水仙 高分子量核DNA BAC文库 脉冲场电泳
• 年，卷（期）: 2011,（12）
• 所属期刊栏目: 生物技术应用
• 页码范围: 2283-2286
• 分类号: S682.21
• 字数: 2694字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-2561.2011.12.017

摘要

以中国水仙(Narcissus tazettaL.var.Chinensis Roem)黄化叶片为材料,比较了2种提取方法对高分子量核DNA(HMW-DNA)制备效果的影响.结果表明,改良Zhang法与Peterson法相比,前者更适合于中国水仙叶片HMW-DNA的提取.将得到的细胞核用低熔点琼脂糖包埋,琼脂糖小块用蛋白酶K最适消化时间为24h,脉冲场凝胶电泳分析结果表明,所获得的HMW-DNA大于1 Mb,这些核DNA能够被限制性内切酶消化;用Southern blot检测,结果表明没有其它细胞器DNA的污染;适合于中国水仙BAC基因组文库的构建.