高迁移率族蛋白B1与活化T细胞核因子2之间存在直接相互作用

• 作者: 丁丽华 刘辉 叶棋浓 姚咏明 宋青 王晓辉 盛志勇 袁斌
• 来源期刊: 临床急诊杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 高迁移率蛋白B1 活化T细胞核因子 蛋白纯化 免疫共沉淀
• 年，卷（期）: 2011,（6）
• 所属期刊栏目: 创伤专栏
• 页码范围: 364-368
• 分类号: R392
• 字数: 4666字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-5918.2011.06.002

摘要

目的:探讨高迁移率蛋白1(high mobility protein box 1,HMGB1)与活化T细胞核因子2(nuclear factor of activating T cells 2,NFAT2)之间的直接相互作用.方法:首先观察HMGB1与NFAT2在细胞外的相互作用,构建pET28a(+)-HMGB1、pGEX-KG-NFAT2质粒,应用网织红细胞系统进行体外翻译得到带有放射性硫同位素“S的His-HMGB1融合蛋白.应用蛋白纯化技术得到的GST-NFAT2融合蛋白,利用GST-pulldown实验检验二者在体外是否可直接结合;然后观察HMGB1与NFAT2在细胞内能否直接结合,构建HMGB1和NFAT2的真核表达质粒,共同转染人胚胎肾293T细胞系,刺激之后裂解细胞,应用相应的抗体进行免疫共沉淀检测,观察二者在细胞内直接结合的情况.结果:利用GST-pull down实验及免疫共沉淀实验证实,HMGB1 全长蛋白与NFAT2全长蛋白在细胞内、外有直接结合的条带,而对照组没有结合条带,说明HMGB1可与NFAT2特异性结合.结论:HMGB1与NFAT2之间存在直接相互作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	盛志勇	解放军总医院第一附属医院烧伤研究所	150	1338	19.0	26.0
2	宋青	解放军总医院外科重症医学科	107	756	15.0	23.0
3	姚咏明	解放军总医院第一附属医院烧伤研究所	298	2402	21.0	30.0
4	刘辉	解放军总医院外科重症医学科	58	420	11.0	18.0
5	丁丽华	解放军军事医学科学院生物工程研究所	3	2	1.0	1.0
6	叶棋浓	解放军军事医学科学院生物工程研究所	7	2	1.0	1.0
7	王晓辉	解放军军事医学科学院生物工程研究所	2	9	1.0	2.0
8	袁斌	解放军军事医学科学院生物工程研究所	1	1	1.0	1.0