食管癌EC-1细胞株polβ启动子突变性转录活性分析

• 作者: 李啸然 李晓坤 李月白 杨妍 王欢 董子明 赵国强
• 来源期刊: 中国公共卫生
• 学科: 医学
• 关键词: DNA聚合酶β(polβ) 萤光素酶报告载体 启动子 突变 食管癌细胞
• 年，卷（期）: 2011,（2）
• 页码范围: 177-179
• 分类号: R735.1
• 语种: 中文

摘要

目的 探讨食管癌细胞EC-1中DNA聚合酶β(DNA polymerase beta,polβ)基因启动子的突变对其转录活性的影响.方法 提取正常永生化细胞293T和EC-1细胞基因组DNA,PCR扩增及测序分析,获得293T细胞野生型及EC-1细胞含-137位和-166位点G→A突变的突变型polβ启动子序列,构建polβ启动子萤光素酶报告基因重组质粒pGL3-neo-293T-polβ/promoter(野生型)和pGL3-neo-EC-1-polβ/promoter(突变型),重组质粒分别转染EC-1、Eca9706或293T细胞株,氨基糖苷类抗生素G418筛选,检测各组萤光素酶活性.结果 野生型及突变型的polβ启动子片段正确插入萤光素酶报告基因载体pGL3-neo-enhancer,成功构建polβ启动子萤光素酶报告基因重组质粒;在3个细胞株中,野生型和突变型重组质粒萤光素酶活性均高于对照组,突变型高于野生型,差异均有统计学意义(P<0.001);突变型重组质粒在EC-1、Eca9706或293T细胞株中的萤光素酶活性值分别为(544 429.5±26 741);(505 683±26 661.1);(415 569.33±32 602.7),差异有统计学意义(P<0.05或P<0.001).结论 食管癌细胞EC-1中DNA polβ基因启动子-137位和-166位点G→A突变可增强其启动子活性;突变型polβ启动子报告基因载体在食管癌细胞中启动子活性较高,提示食管癌细胞中可能存在使其突变型polβ启动子活性增加的作用因子.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	赵国强	郑州大学基础医学院微生物与免疫教研室	245	807	11.0	16.0
2	李月白	郑州大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室	65	476	12.0	17.0
3	董子明	郑州大学基础医学院病理与病生教研室	237	965	14.0	19.0
4	杨妍	郑州大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室	17	14	2.0	2.0
5	李晓坤	郑州大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室	3	5	2.0	2.0
6	李啸然	郑州大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室	3	4	2.0	2.0
7	王欢	郑州大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室	33	48	5.0	5.0