猪繁殖与呼吸综合征病毒XH株感染性克隆的构建

• 作者: 于俊勇 吴欣伟 张桂红 曹宗喜 熊永忠 秦宏阳 郭泗虎 闫明菲
• 来源期刊: 中国预防兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 猪繁殖与呼吸综合征病毒 全长cDNA 拯救病毒
• 年，卷（期）: 2011,（2）
• 页码范围: 97-100
• 分类号: S852.65
• 字数: 2573字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1008-0589.2011.02.04

摘要

为构建猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)反向遗传操作系统.本实验采用RT-PCR方法将PRRSV-XH株的基因组序列分为6个片段进行扩增,连接至低拷贝载体pOKQ中,获得全长cDNA克隆.将该克隆体外转录,经脂质体转染Marc-145细胞,观察细胞病变.经RT-PCR、间接免疫荧光和western blot等试验验证,表明构建了具有感染性的PRRSV-XH株全长cDNA克隆.本实验为在分子水平上研究PRRSV的复制、致病机理和基因产物的功能等方面提供技术支持,并为构建新型病毒载体和开发安全有效的活病毒疫苗奠定基础.