梅山猪胎儿成纤维细胞的分离培养及SRY-PCR法快速性别鉴定

• 作者: 季索菲 张运海 曹海峰 李运生 章孝荣 陶勇 随刘才
• 来源期刊: 安徽农业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 成纤维细胞系 SRY 性别鉴定
• 年，卷（期）: 2011,（6）
• 所属期刊栏目: 动物科学与动物医学
• 页码范围: 907-910
• 分类号: S828.81
• 语种: 中文
• DOI: 34-1162/S.20111025.1025.004

摘要

对梅山猪胎儿成纤维细胞的分离培养及性别快速鉴定进行研究,为开展猪体细胞克隆、诱导多能干细胞获取及转基因等提供素材.通过取组织块培养法和胰蛋白酶消化培养法均成功得到梅山猪的胎儿(胎龄35 d)成纤维细胞,取其中7个梅山猪(msz4、msz5、msz6、msz9、msz11、msz14和msz15)胎儿的原代成纤维细胞,在传代培养至第5代时收集贴壁生长的细胞,提取基因组DNA.再利用根据SRY及ZFY/X设计的共2对引物进行PCR反应,扩增后进行琼脂糖凝胶电泳,出现166 bp和445/447 bp两条带的为雄性,只有445/447 bp一条带的为雌性.结果表明梅山猪的细胞系msz6、msz9和msz14为雌性细胞系,而msz4、msz5、msz11及msz 15为雄性细胞系.试验结果证明了该方法可应用于鉴定不同培养方法获得猪成纤维细胞的性别,可为试验后期的转基因细胞制备提供性别依据.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陶勇	安徽农业大学动物科技学院	80	471	12.0	15.0
3	张运海	安徽农业大学动物科技学院	61	264	9.0	14.0
5	李运生	安徽农业大学动物科技学院	29	68	5.0	7.0
7	随刘才	安徽农业大学动物科技学院	2	10	2.0	2.0
11	季索菲	安徽农业大学动物科技学院	1	7	1.0	1.0