Flt3L对小鼠胸腺树突状细胞在FTOC体系中分化发育的作用

• 作者: 张学光 朱雪明 李毅平 李芳 汪健 王泳 许云云
• 来源期刊: 现代免疫学
• 学科: 医学
• 关键词: FTOC Flt3L 胸腺树突状细胞 c-kit+造血干细胞
• 年，卷（期）: 2011,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 450-455
• 页数: 6页
• 分类号: R392.1
• 语种: 中文

摘要

为了借助FTOC体系探讨Flt3L对小鼠胸腺树突状细胞分化发育的影响.摘取15～16 d龄胎鼠胸腺进行体外器官培养(胎鼠胸腺器官培养—FTOC),根据所使用培养基的不同实验分为两组:对照组(基础培养基)和Flt3L组(培养基中含有细胞因子Flt3L),在体外进行FTOC常规培养,12 d后分别收集两实验组的胸腺细胞,流式细胞仪检测细胞表面分子CD4、CD8、CD11c、Ia等的表达,通过光学显微镜观察细胞形态.骨髓来源的c-kit+造血干细胞通过悬滴培养方法种植入2-脱氧鸟苷处理过的胸腺,随后将胸腺放置于组织器官培养皿中所使用的培养基为基础培养基或加入细胞因子Flt3L的培养基,进行为期12 d的FTOC常规培养.12 d后收集不同条件下FTOC培养的胸腺细胞,通过流式细胞仪对胸腺细胞的表型进行分析;将在不同条件下FTOC培养获得的胸腺细胞进行MACS分选,从而获得胸腺树突状细胞(CD11c+ DC),再与异源的CD4+T细胞进行混合淋巴细胞反应,通过MTT法检测T细胞的增殖情况.结果:在正常FTOC体系中,流式细胞仪检测结果和细胞形态学结果显示:Flt3L组胸腺DC有明显的增加,且FTOC联合悬滴培养体系中Flt3L组胸腺DC的生成率明显高于对照组;MTT检测结果也显示:没有CpG2006刺激时,胸腺DC刺激T细胞增殖的能力比较弱,但添加CpG2006刺激后,胸腺DC趋向于成熟表型,刺激T细胞增殖的能力有所增强.提示,Flt3L在小鼠胸腺DC的分化发育中发挥重要的调节作用,明显促进小鼠骨髓来源的c-kit+造血干细胞向胸腺DC的分化.