新型阳离子聚合物非病毒载体介导野生型p53基因体外转染效果的研究

• 作者: 丁杨 周建平 徐苏颖 王伟 王玉 王若宁
• 来源期刊: 中国临床药理学与治疗学
• 关键词: 尿刊酸修饰的壳聚糖 野生型p53 基因转染 人肝癌细胞系 细胞周期阻滞
• 年，卷（期）: 2011,（11）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1227-1233
• 分类号: R965.2
• 语种: 中文

摘要

目的:研究新型阳离子聚合物非病毒载体——尿刊酸修饰的壳聚糖(UAC)介导野生型p53(wt-p53)基因体外转染人肝癌细胞系HepG2的效果.方法:载体UAC包裹含绿色荧光蛋白(GFP)报告基因和wt-p53治疗基因的质粒(pEGFP-p53)转染HepG2细胞,利用流式细胞术和荧光显微术检测细胞内GFP的表达,优选最佳转染条件；采用RT-PCR法检测细胞内p53mRNA的表达,流式细胞术评价基因转染对细胞周期的影响,Western blot法检测细胞内p53及其下游细胞周期调控蛋白的表达.结果:在低pH(pH=6.9)条件下,采用低壳聚糖分子量(20000)的UAC作为载体,与pEGFP-p53形成高N/P(N/P=30)的UAC/ pEGFP-p53复合物转染HepG2细胞,可获得最佳转染效果；载体UAC介导wt-p53基因转染细胞后,p53 mRNA表达水平明显上调,G0/G1期出现显著阻滞,p53、p21和Rb蛋白表达水平明显上调,cyclin D1和CDK4蛋白表达水平明显下调.结论:载体UAC可成功介导wt-p53基因转染HepG2细胞,并诱导其产生细胞周期阻滞.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王玉	南京医科大学药理学系	15	59	4.0	7.0