旱柳根系蛋白质双向电泳体系的建立

• 作者: 乔桂荣 刘明英 卓仁英 张小果 李海营 李翠云 蒋晶 邱文敏
• 来源期刊: 浙江农林大学学报
• 关键词: 林木育种学 旱柳 蛋白质组学 双向电泳
• 年，卷（期）: 2011,（4）
• 所属期刊栏目: 研究简报
• 页码范围: 653-661
• 分类号: S718.3
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-0756.2011.04.021

摘要

林木抗逆机制的研究是林木抗逆育种的重要基础.为了解旱柳Salix matsudana耐盐机制,实验采用蛋白质双向电泳技术研究盐碱胁迫前后旱柳蛋白表达变化,分离鉴定旱柳耐盐相关基因,建立一套适合于旱柳根系蛋白质的双向电泳技术体系是蛋白质组学的基础.用改进的酚抽法抽提旱柳根总蛋白,此方法不仅能很好地分离蛋白,而且能有效去除样品中的盐分.通过比较分析了双向电泳不同条件对电泳结果的影响,确立了900 μg·胶条-1的最佳上样量,10min平衡时间以及10万V·h的聚焦时间的双向电泳条件.还比较了氯化钠胁迫后双向电泳图谱差异,发现了39个差异表达蛋白,其中15个下调,24个上调(11个新诱导表达),为下一步通过质谱鉴定分析旱柳耐盐分子机制及抗性基因分离奠定了基础.