建立紫花苜蓿PHYA和PHYB mRNA表达水平FQ-PCR检测方法

• 作者: 严学兵 樊文娜 王成章
• 来源期刊: 江西农业学报
• 学科: 农学
• 关键词: SYBR Green Ⅰ 紫花苜蓿 PHYA PHYB mRNA表达量 秋眠
• 年，卷（期）: 2011,（4）
• 所属期刊栏目: 牧草·烟草·食用菌
• 页码范围: 96-100
• 分类号: S963.223.3
• 字数: 3297字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-8581.2011.04.031

摘要

紫花苜蓿的秋眠与光敏色素基因的表达紧密相关.为了建立一种快速、灵敏检测紫花苜蓿PHYA 和 PHYB 基因mRNA表达水平的实时逆转录聚合酶链反应(FQ-PCR)体系,本研究提取紫花苜蓿叶片总RNA,PCR扩增Actin、PHYA和PHYB基因片段,将其克隆入pMD18-T载体进行测序.基于SYBR Green Ⅰ双链嵌合染料建立检测紫花苜蓿 PHYA 和 PHYB 基因mRNA表达水平方法,对PCR产物的熔解曲线进行分析评价其特异性,经测序鉴定目的片段已插入pMD18-T载体内,重组质粒的构建非常成功.为验证其准确性,我们检测紫花苜蓿WL-232 PHYA、PHYB mRNA表达量,结果证明:所建立的测定PHYA和PHYB基因mRNA水平的方法准确,适用于紫花苜蓿的各种组织的大量样本检测.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王成章	河南农业大学牧医工程学院	232	3606	32.0	46.0
2	樊文娜	河南农业大学牧医工程学院	20	310	11.0	17.0
3	严学兵	河南农业大学牧医工程学院	70	1116	21.0	30.0