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摘要:
目的 制备天然和重组肝素结合血凝素(HBHA)蛋白,探讨其在结核杆菌感染诊断中的应用价值.方法 用聚合酶链反应从结核分枝杆菌H37 Rv基因组扩增出HBHA基因片段.结核分枝杆菌HBHA基因克隆至PQE80L克隆表达载体中,序列测定正确后,将其转化到大肠埃希菌BL-21中,再经异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达HBHA蛋白,表达蛋白经SDS-PAGE及免疫印迹法分析后,亲和层析法纯化蛋白,并以此免疫新西兰兔制备多克隆抗体.同时将7H9液体培养基中的卡介苗(BCG)培养至稳定生长期,用CL-6B层析柱分离纯化HBHA蛋白.观察抗体对不同浓度天然HBHA和重组HBHA诱导BCG聚集效应的影响.结果 所得天然和重组HBHA蛋白均有诱导BCG聚集的作用,并均可被多克隆抗体抑制.结论 成功获得天然HBHA和重组HBHA蛋白;证实了两者均具有促进BCG聚集的功能,并可被由重组HBHA诱导产生的多克隆抗体所抑制.从而为进一步研究HBHA的临床诊断价值提供了实验依据.
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文献信息
篇名 肝素结合血凝素蛋白在结核病诊断中的应用研究
来源期刊 检验医学 学科 医学
关键词 肝素结合血凝素蛋白 多克隆抗体 结核分枝杆菌
年,卷(期) 2011,(12) 所属期刊栏目 生物化学检验论著
研究方向 页码范围 806-810
页数 分类号 R446.1
字数 3643字 语种 中文
DOI 10.3969/j.issn.1673-8640.2011.12.003
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 徐修礼 第四军医大学西京医院全军临床检验医学中心 154 1525 19.0 30.0
2 马越云 第四军医大学西京医院全军临床检验医学中心 112 451 11.0 15.0
3 刘家云 第四军医大学西京医院全军临床检验医学中心 117 731 14.0 20.0
4 孙怡群 第四军医大学西京医院全军临床检验医学中心 93 872 15.0 24.0
5 樊新 第四军医大学西京医院全军临床检验医学中心 97 775 15.0 23.0
6 周珊 第四军医大学西京医院全军临床检验医学中心 14 87 6.0 9.0
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研究主题发展历程
节点文献
肝素结合血凝素蛋白
多克隆抗体
结核分枝杆菌
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
检验医学
月刊
1673-8640
31-1915/R
大16开
上海市浦东新区洪山路528号
1986
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