沉默p65基因对人乳腺癌细胞MDA-MB-231细胞周期的影响

• 作者: 单保恩 张超 王玲 赵连梅
• 来源期刊: 肿瘤防治研究
• 学科: 医学
• 关键词: 乳腺癌 miRNA p65 细胞周期
• 年，卷（期）: 2011,（11）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1236-1240
• 分类号: R735.9
• 语种: 中文
• DOI: 10.3971/j.issn.1000-8578.2011.11.005

摘要

目的 研究miRNA(microRNA)沉默p65基因后对人乳腺癌细胞株MDA-MB-231细胞周期分布的影响.方法 用pcDNATM6.2-GW/EmGFP-miR载体构建p65 miRNA表达质粒,转染MDA-MB-231细胞,用RT-PCR检测转染前后各组细胞中p65 mRNA表达变化；凝胶电泳迁移率改变分析(electrophoretic mobility shift assay,EMSA)实验研究转染前后细胞中NF-κB结合活性的变化；流式细胞术(Flow cytometry,FCM)观察转染前后细胞周期分布的变化；Western blot法检测转染前后细胞周期相关因子cyclinD1、CDK4、p21蛋白表达的变化.结果 p65 miRNA质粒明显下调MDA-MB-231细胞中p65 mRNA的表达水平,并显著抑制细胞中NF-kB的结合活性(P＜0.05).FCM结果显示,转染组细胞G0/G1期细胞比例显著增加,S、G2/M期细胞比例明显下降(P＜0.05)；Western blot分析结果显示,沉默p65基因后细胞中cyclinD1蛋白表达下调,p21蛋白表达增加.结论 p65 miRNA可以显著降低p65 mRNA的表达,诱导乳腺癌细胞发生G0/G1期阻滞,可能是通过降低cyclinD1蛋白,上调p21蛋白表达而实现的.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王玲	河北医科大学第四医院科研中心河北省肿瘤研究所免疫室	55	271	9.0	13.0
2	赵连梅		2	15	2.0	2.0
3	张超		1	4	1.0	1.0