脐血造血干/祖细胞与脂肪干细胞共培养的作用距离研究

• 作者: 刘天庆 宋克东 崔占峰 方美云 朱丽丽 武爽 石芳鑫 郝永杰 郭文华 马学虎
• 来源期刊: 高校化学工程学报
• 学科: 医学
• 关键词: 脂肪干细胞 造血干/祖细胞 transwell 共培养 脐带血
• 年，卷（期）: 2011,（5）
• 所属期刊栏目: 生物化工
• 页码范围: 809-815
• 分类号: R343.6
• 字数: 4228字
• 语种: 中文
• DOI: 33-1141/TQ.20110906.1441.001

摘要

设计了一种细胞间距可调的transwell共培养方法,以研究脐带血来源的造血干/祖细胞(HS/PCs)和人脂肪干细胞(human-adipose derived stem cells,h-ADSCs)体外共培养时细胞间作用距离对造血干细胞扩增能力和脂肪干细胞在共培养后干细胞特性的影响.采用不同规格的砂纸打磨孔板的上壁面,经高精度游标卡尺测量,使两种细胞之间的有效接触间距为10～450 μm不等.然后以h-ADSCs为基质细胞,分别考察HS/PCs和h-ADSCs在不同的作用距离下的共培养情况.其间每24小时对细胞进行计数,观察细胞形态.培养7天后对MNCs表面抗原CD34+、CFU-GM集落扩增倍数进行了检测；同时也对h-ADSCs表面抗原(CD13、CD29、CD34、CD44、CD45、CD73、CD105、CD166、HLA-DR)及其多向分化潜能(成骨、成软骨、成脂肪)进行分析以鉴定其干细胞性能.结果表明,通过transwell共培养,细胞之间在作用距离为350μm时HS/PCs的扩增效果最好,其中造血MNCs扩增了15.1±0.2倍,CD34+扩增了5.0±0.1倍；扩增的h-ADSCs表达CD29、CD44、CD166,而不表达CD34、CD45,且在适当诱导条件下可以向成骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞分化.