Survivin小干涉RNA和GRIM-19共表达质粒的构建

• 作者: 富东娜 文连姬 汲坤 管国芳 赵雪俭 金春顺 高丽芳
• 来源期刊: 中国耳鼻咽喉头颈外科
• 学科: 医学
• 关键词: RNA干扰 喉肿瘤 凋亡抑制蛋白类 生存素 GRIM-19基因
• 年，卷（期）: 2011,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 63-66
• 分类号: R3
• 字数: 3262字
• 语种: 中文

摘要

目的 构建survivin小干涉RNA和干扰素,维甲酸联合应用诱导细胞凋亡相关的基因(gene associated withretinoid interferon induced mortality-19,GRlM-1 9)共表达质粒为探讨联合基因对喉癌细胞凋亡和增殖的影响奠定基础.方法 以survivin小干涉RNA重组质粒pGCsilencer-siRNA-survivin(简称psi-survivin)为模板设计PCR引物,PCR产物经测序后与线性化pCDNA3.1-GRIM-19(简称p-GRIM-19)连接,构建survivin小干涉RNA和GRIM-19共表达质粒pCDNA3.1-siRNA survivin/GRIM-19(简称p-siRNAsurvivin/GRIM-19).将质粒用脂质体lipofetamine2000包裹转入人喉癌Hep-2细胞中,用半定量RT-PCR检测survivin和GRIM-19 mRNA的含量.结果 构建的survivin小干涉RNA和GRIM-19共表达质粒P-siRNA survivin/GRIM-19经酶切电泳和测序证实碱基序列的正确性,p-siRNAsurvivin/GRIM-19转染人喉癌Hep-2细胞,从mRNA水平能降低survivin的表达,抑制率55.9%,同时增加GRIM-19表达,表明共表达质粒的构建是成功的.结论 构建的siRNA survivin和GRIM-19共表达质粒从mRNA水平能降低survivin的表达,同时增加GRlM-19表达,为进一步实验奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	金春顺	吉林大学第二医院耳鼻咽喉科	68	232	8.0	10.0
2	文连姬	吉林大学第二医院耳鼻咽喉科	45	104	5.0	7.0
3	管国芳	吉林大学第二医院耳鼻咽喉科	41	134	6.0	9.0
4	赵雪俭	吉林大学基础医学院病理生理教研室	130	887	16.0	22.0
5	富东娜	齐齐哈尔医科大学生化教研室	8	13	2.0	3.0
6	汲坤	沈阳医学院病理生理教研室	17	53	4.0	7.0
7	高丽芳	沈阳维康医院耳鼻咽喉科	1	0	0.0	0.0