GRIM-19原核表达载体的构建及GST-GRIM-19的诱导表达与纯化

• 作者: 冯定庆 凌斌 周颖 朱园园 朱靖 李彩荣 王青元
• 来源期刊: 安徽医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 遗传载体 原核细胞 重组融合蛋白质类
• 年，卷（期）: 2011,（5）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 493-496
• 分类号: R394.3|R341
• 字数: 2699字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-1492.2011.05.027

摘要

目的 构建GRIM-19原核表达载体,在大肠杆菌中诱导表达并纯化GST-GRIM-19融合蛋白.方法 用RT-PCR法从HeLa细胞中扩增出含BamHⅠ、XhoⅠ酶切位点的GRIM-19基因片段,将其克隆至pGEX-4T-3原核表达载体上,在大肠杆菌中诱导表达GST-GRIM-19融合蛋白,用Glutathione Sepharose 4B纯化,纯化后蛋白经Western blot鉴定.结果 构建pGEX-4T-3-GRIM-19原核表达载体成功,表达的GST-GRIM-19融合蛋白相对分子质量约45 ku,浓度0.1 mmol/L异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导2 h,并成功纯化到融合蛋白.结论 成功构建GRIM-19原核表达载体,诱导表达并纯化GST-GRIM-19融合蛋白.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	凌斌	安徽医科大学附属省立医院妇产科分子实验室	83	347	8.0	13.0
2	朱靖	安徽医科大学附属省立医院妇产科分子实验室	13	54	4.0	7.0
3	周颖	安徽医科大学附属省立医院妇产科分子实验室	87	381	11.0	15.0
4	冯定庆	安徽医科大学附属省立医院妇产科分子实验室	51	149	6.0	9.0
5	朱园园	安徽医科大学附属省立医院妇产科分子实验室	18	91	6.0	9.0
6	王青元	安徽医科大学附属省立医院妇产科分子实验室	12	44	4.0	6.0
7	李彩荣	安徽医科大学附属省立医院妇产科分子实验室	9	49	4.0	7.0