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摘要:
目的:构建抑瘤素M(OSM)重组腺病毒载体,研究其对人黑色素瘤细胞A375的抑制作用.方法:以PEGZ-OSM重组质粒为模板,通过PCR技术扩增出OSM片段,采用腺病毒载体的基因重组和体外包装技术获得表达与人OSM氨基酸序列相同的重组腺病毒子Ad-OSM,感染A375细胞,用荧光显微镜、RT-PCR、Western blot法检测OSM在A375细胞中的转录和表达;荧光显微镜观察A375细胞的形态学改变;MTT法和流式细胞术(FCM)检测Ad-OSM对A375细胞的生长抑制和细胞周期的抑制效应;半定量RT-PCR法检测OSM基因表达对A375细胞中的Bax、Bcl-2基因表达的影响.结果:基因测序和PCR分析结果显示,成功构建了Ad-OSM腺病毒表达载体;RTPCR和Western blot法检测到OSM基因在A375细胞中的转录和表达;OSM基因的表达对A375细胞增殖有明显抑制作用,并可诱导细胞凋亡,OSM基因可通过上调细胞中Bax和下调Bcl-2基因表达诱导细胞凋亡.结论:成功构建了Ad-OSM腺病毒表达载体,感染OSM基因可明显抑制A375人黑色素瘤细胞的生长,诱导其凋亡,该现象可能是通过改变Bax、Bcl-2基因表达水平来发挥抗肿瘤作用.
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文献信息
篇名 腺病毒介导的人抑瘤素M基因对A375人黑色素瘤细胞的抑制作用
来源期刊 中国生物工程杂志 学科 生物学
关键词 抑瘤素OSM 腺病毒载体 构建 黑色素瘤 凋亡
年,卷(期) 2011,(11) 所属期刊栏目 研究报告
研究方向 页码范围 24-30
页数 分类号 Q81
字数 语种 中文
DOI
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 缪竞诚 苏州大学基础医学与生物科学学院细胞生物学系 95 511 13.0 17.0
2 杨吉成 苏州大学基础医学与生物科学学院细胞生物学系 164 943 16.0 20.0
3 盛伟华 苏州大学基础医学与生物科学学院细胞生物学系 129 700 15.0 18.0
4 张凤娟 苏州大学基础医学与生物科学学院细胞生物学系 25 157 7.0 12.0
5 王家融 苏州大学基础医学与生物科学学院细胞生物学系 4 17 2.0 4.0
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中国生物工程杂志
月刊
1671-8135
11-4816/Q
大16开
北京中关村北四环西路33号
82-13
1976
chi
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