四氯二苯二噁英致胎鼠腭裂作用机制的初步探讨

• 作者: 何晓梦 傅跃先 刘丽玲 甘立强 蒲亚兰
• 来源期刊: 中华整形外科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 腭裂 四氯二苯二噁英 转化生长因子-β3
• 年，卷（期）: 2011,（6）
• 所属期刊栏目: 实验论著
• 页码范围: 448-453
• 分类号: R6
• 字数: 3815字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1009-4598.2011.06.012

摘要

目的 探讨四氯二苯二噁英(2,3,7,8-tetrachlorodibenzo-p-dioxin,TCDD)致胎鼠先天性腭裂的可能作用机制.方法 12只C57BL/6J孕鼠于妊娠第10天随机分为实验组和对照组,每组6只,实验组以TCDD 64 μg/kg灌胃,对照组以等量玉米油灌胃,于妊娠第18.5天在解剖显微镜下观察胎鼠腭裂的发生率.另取18只C57BL/6J孕鼠,于妊娠第10天随机分为实验组和对照组,每组9只,处理方法同前,根据标本采集时间不同,每组又分为妊娠第13.5、14.5和15.5天3个亚组,每个亚组3只,分别于妊娠第13.5、14.5和15.5天剪取胎鼠腭突组织提取RNA和DNA,采用RTPCR检测Smad 2～4及Smad 7 mRNA的表达情况、甲基化特异性PCR(methylmion specific PCR,MSP)检测转化生长因子-β3(transforming growth factor-β3,TGF-β3)基因启动子甲基化水平.两样本间均数比较采用t检验.结果 TCDD成功诱导建立C57BL/6J胎鼠先天性腭裂模型,实验组腭裂发生率为100％,对照组无腭裂发生.在妊娠第13.5、14.5和15.5天,RT-PCR显示实验组Smad 2mRNA的相对表达值分别为0.263±0.088、0.296±0.016和0.159±0.027,对照组为0.180±0.042、0.282±0.029和0.165±0.018,差异无统计学意义(t=- 1.474、- 0.762、0.321,P＞0.05)；实验组Smad 3 mRNA的相对表达值分别为0.453±0.153、0.551±0.160和0.328±0.049,对照组为0.375±0.126、0.510±0.145和0.259±0.035,差异无统计学意义(t=-0.678、- 0.336、-2.005,P＞0.05)；实验组Smad 4 mRNA的相对表达值分别为0.675±0.174、0.577±0.070和0.396±0.066,对照组为0.557±0.138、0.587±0.080和0.441±0.054,差异无统计学意义(t=- 0.926、0.161、0.927,P＞0.05)；实验组Smad 7 mRNA的相对表达值分别为0.283±0.050、0.320±0.068和0.169±0.045,对照组为0.207±0.043、0.288±0.051和0.155±0.040,差异无统计学意义(t=-2.003、-0.651、-0.391,P＞0.05).MSP显示实验组和对照组TGF-β3基因启动子均处于非甲基化状态.结论 TCDD可致C57BL/6J胎鼠发生先天性腭裂,其机制不是通过经典的TGF-β/Smad信号通路和TGF-β3基因甲基化修饰而发生作用.