FSH对体外培养仔猪睾丸支持细胞skp2表达的影响

• 作者: 孙燕 左敬 张国升 张家骅 朱峰伟 王鲜忠 甘瑞
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 促卵泡素 睾丸支持细胞 S期激酶相关蛋白2 细胞外信号调节的蛋白激酶1/2 p27kip1
• 年，卷（期）: 2011,（6）
• 所属期刊栏目: 遗传繁育
• 页码范围: 765-771
• 分类号: S828|Q38
• 字数: 4168字
• 语种: 中文

摘要

本研究旨在确定促卵泡素是否可通过cAMP、Ca2+内流和细胞外调节的蛋白激酶(ERK1/2)调节培养条件下未成熟仔猪睾丸支持细胞中S期激酶相关蛋白2(skp2)的表达.以培养的仔猪睾丸支持细胞为实验材料,通过添加各种信号通路的抑制剂,运用Western blot检测skp2、p27kip1蛋白的表达,运用实时荧光定量PCR检测skp2 mRNA的表达.结果发现,促卵泡素(50 ng·mL-1)以时间依赖的方式促进了skp2蛋白和mRNA的表达(P＜0.05),这一作用在30 min时达到高峰.FSH(50 ng·mL-1)和Forsko1in(10 μmol·L-1)均促进了skp2蛋白和mRNA的表达(P＜0.05),但降低了p27kip1蛋白的水平,而Rp-cAMP、Verapamil和U0126都抑制了FSH的作用,使skp2蛋白和mRNA的表达有所下降,但提高了p27kip1蛋白的表达,但3种抑制剂单独作用时对skp2蛋白、mRNA以及p27kip1蛋白的表达没有显著影响(P＞0.05).这表明FSH可能主要通过影响cAMP的产生和Ca2+内流,并激活ERK1/2通路调节skp2蛋白的表达,而skp2蛋白的水平与p27kip1蛋白成负相关.