FSH和17β-雌二醇联合作用对仔猪睾丸支持细胞Skp2表达的调节

• 作者: 孙燕 左敬 张国升 张家骅 朱峰伟 王鲜忠 甘瑞
• 来源期刊: 中国农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: FSH 17β-雌二醇 睾丸支持细胞 S期激酶相关蛋白2 细胞外信号调节的蛋白激酶1/2
• 年，卷（期）: 2011,（11）
• 所属期刊栏目: 畜牧·资源昆虫
• 页码范围: 2347-2354
• 分类号: S865.12
• 语种: 中文
• DOI: 10.3864/j.issn.0578-1752.2011.11.018

摘要

[目的]确定FSH和雌激素联合作用是否可通过ERK1/2级联调节培养条件下未成熟仔猪睾丸支持细胞中Skp2的表达.[方法]以培养的仔猪睾丸支持细胞为试验材料,通过添加各种信号通路的抑制剂,应用Wostorn blotting和实时荧光定量PCR检测Skp2蛋白、mRNA的表达.[结果]FSH(50 ng·mL-1)和17β-雌二醇(10-9mol·L-1)联合作用时以时间依赖的方式促进了Skp2蛋白和mRNA的表达(P<0.05),这一作用在30 min时到达高峰;FSH(50 ng·mL-1)、17β-雌二醇(10-9mol·L-1)和forskolin单独作用均促进了Skp2蛋白和mRNA的表达(P<0.05),FSH(50 ng·mL-1)和17-β雌二醇(10-9mol·L-1)联合作用对Skp2表达的影响与PSH或17β-雌二醇(10-9mol·L-1)单独作用无显著差异(P>0.05),而环磷酸腺苷抑制剂(Rp-cAMP)、蛋白激酶A(PKA)抑制剂(H-89)、L-Ca2+离子通道抑制剂(verapamil)和ERK1/2抑制剂(U0126)单独作用时对Skp2蛋白和mRNA的表达与空白对照相比无显著影响(P>0.05),但都抑制了FSH(50 ng·mL-1)与17β-雌二醇(10-9mol·L-1)联合作用对Skp2蛋白和mRNA表达的影响(P<0.05).H-89、verapamil单独作用对ERK1/2(细胞外信号调节的蛋白激酶1/2)活性没有影响,但降低了PSH(50 ng·mL-1)和17β-雌二醇(10-9-mol·L-1)联合作用对ERK1/2活性的影响.[结论]FSH与17β-雌二醇联合作用激活了cAMP-PKA级联和Ca2+内流,而PKA和Ca2+内流又通过影响ERK1/2的活性进而影响Skp2的表达.