5种脑炎人兽共患病病毒多重RT-PCR检测方法的建立

• 作者: 刘洪 刘霓红 吴东来 孙恩成 康晓平 李文京 李裕昌 杨涛 杨银辉 步志高 王凌凤 蔡绪禹
• 来源期刊: 中国预防兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 流行性乙型脑炎病毒 森林脑炎病毒 东方马脑炎病毒 西方马脑炎病毒 基孔肯雅病毒 多重RT-PCR
• 年，卷（期）: 2011,（2）
• 页码范围: 118-121
• 分类号: S852.65
• 字数: 2194字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1008-0589.2011.02.09

摘要

为建立同时检测流行性乙型脑炎病毒(JEV)、森林脑炎病毒(TBEV)、东方马脑炎病毒(EEEV)、西方马脑炎病毒(WEEV)和基孔肯雅病毒(CHIKV)5种人兽共患脑炎病病毒的多重RT-PCR方法,本研究根据GenBank登录的相关病毒基因序列设计特异引物,通过优化引物组合及PCR反应条件,建立可同时检测5种病毒的方法,扩增片段长度分别为411 bp(JEV)、945 bp(TBEV)、193 bp(EEEV)、545 bp(WEEV)和769 bp(CHIKV);该方法具有良好的特异性,对病毒核酸最低检测拷贝数分别为7.1×103、3.6×103、2.2×103、5.6×103和5.1×103.该方法具有特异性强、灵敏度高、操作简便等优点,为以上5种人兽共患脑炎病病毒提供快速检测手段.