松材线虫两种实用分子检测技术

• 作者: 叶建仁 吴小芹 谈家金 陈凤毛 黄麟
• 来源期刊: 北京林业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 松材线虫 实用分子技术 SCAR标记 实时PCR 检测
• 年，卷（期）: 2011,（4）
• 所属期刊栏目: 研究简报
• 页码范围: 149-152
• 分类号: S763.1
• 语种: 中文

摘要

为检验已开发的SCAR标记与实时PCR两种分子检测方法鉴定松材线虫的可靠性，本文选用线虫未知种样品7个以及已知种样品3个为实验材料，采用上述两种分子检测方法进行检测，并且对7个线虫未知种样品进行形态鉴定。结果表明：1）运用SCAR标记检测，第2、3、4、7号4个未知种样品与8号松材线虫样品出现了一条清晰、明亮的860bp特异条带，第1、5、6号样品与9号拟松材线虫、10号大核滑刃线虫均未出现扩增谱带，表明第2、3、4、7号4个待测样品中含有松材线虫，而第1、5、6号3个待测样品中不含有松材线虫；2）运用实时PCR检测，第2、3、4、7号4个样品与8号松材线虫样品表现有明显的阳性扩增信号，其余样品均未出现扩增信号，也无循环阈值（Ct值）；3）对7个未知种样品的形态鉴定结果为：第2、4、7号样品为松材线虫样品，3号样品中除松材线虫外还含有其他线虫，第1、5、6号3个样品不含松材线虫。对于松材线虫的检测，两种分子检测结果与形态鉴定结果完全一致，且两种分子检测方法对松材线虫都具有很强的特异性，都可以在较短时间内对松材线虫进行鉴定。其中SCAR标记检测方法约需2h，实时PCR检测方法约需1h。实现了对松材线虫幼虫快速检测目标，检测结果便于判读。