视网膜Müller细胞透明质酸酶功能分析

• 作者: 乔伟振 赵伟 陆融
• 来源期刊: 眼科新进展
• 学科: 医学
• 关键词: Müller细胞 透明质酸酶 底物胶
• 年，卷（期）: 2011,（6）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 538-540
• 页数: 3页
• 分类号: R774.1
• 字数: 2656字
• 语种: 中文

摘要

目的 分析离体培养的视网膜Müller细胞对透明质酸的降解功能.方法 提取的Müller细胞来自酶降解的猪后极部视网膜.并以3种不同细胞标记:胶质纤维酸性蛋白、波形蛋白、谷氨酰胺合成酶进行免疫荧光确认.细胞分为4组,其中1组培养液中加入透明质酸,2组培养液中加入透明质酸和抗integrin α1β1抗体,3组培养液中加入透明质酸和抗CD44抗体,4组培养液中未加入其他试剂.细胞预培养后,收集上清液.按配置聚丙烯酰胺凝胶的方法,加入透明质酸,不加入十二烷基硫酸钠制作底物胶.样品在底物胶电泳后,凝胶在酶降解缓冲液中培养24 h,淋洗后以5 g·L-1亮蓝染色、体积分数7%醋酸脱色,观察有无透明质酸降解后形成的脱色条带.结果 93.8%细胞胶质纤维酸性蛋白抗体染色阳性,94.6%细胞波形蛋白抗体染色阳性,88.6%细胞谷氨酰胺合成酶抗体染色阳性.培养的Müller细胞有降解透明质酸的功能,(4组)表现为蓝色背景(透明质酸染色)下的淡白色双条带(透明质酸降解后脱色);将细胞和透明质酸预培养可使脱色条带明显增厚,表现为明亮的白色条块(1组),同时加入透明质酸和integrinα2β1抗体产生相似的白色条块(2组),同时加入透明质酸和CD44抗体使脱色恢复为淡白色双条带(3组).结论 培养的Mülle,细胞有降解透明质酸的功能,细胞与透明质酸的相互作用明显加强细胞降解透明质酸的功能,CD44抗体可能减弱这种加强作用.integrinα2β1抗体无明显作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	赵伟	南京医科大学附属无锡市人民医院眼科	20	93	5.0	9.0
2	陆融	南京医科大学附属无锡市人民医院眼科	12	8	2.0	2.0
3	乔伟振	南京医科大学附属无锡市人民医院中心实验室	19	63	5.0	7.0