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摘要:
提取人肝癌SMMC-7721细胞和小鼠NSO细胞总RNA,对热休克蛋白10基因(Hspl0)进行RT-PCR扩增、TA克隆和测序.结果表明,从上述2种细胞中获得的cDNA分别由312,313 bp组成,与报道的人HSPE1 mRNA(NM002157)、鼠肌肉Hspel mRNA(NM-008303)序列同源性分别为99%,97%,命名为HSPEl-1和Hspel-Ⅰ,序列分析表明,二者之间在核苷酸水平上的同源性为92%,氨基酸水平上的同源性为97%.将上述2种cDNA进行双酶切、亚克隆,成功构建了重组表达载体pET-28a-HSPE1-1与pET-28a-Hspe1-1,转化大肠杆菌并进行了诱导表达.检测结果表明,pET-28a-HSPE1-1与pET-28a-Hspe1-1均能在大肠杆菌中表达,表达蛋白分子量大小约为14 kDa,与预期大小一致.Western-Blot结果证实了其为目的蛋白,经镍树脂柱纯化,获得了相应的重组蛋白.为进一步研究这2种蛋白的结构、功能及临床应用奠定了基础.
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热休克蛋白
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内容分析
关键词云
关键词热度
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文献信息
篇名 人热休克蛋白10和鼠热休克蛋白10的克隆、序列分析及其原核表达
来源期刊 华北农学报 学科 生物学
关键词 热休克蛋白 人热休克蛋白1 鼠热休克蛋白1 基因克隆 原核表达
年,卷(期) 2011,(3) 所属期刊栏目
研究方向 页码范围 56-59
页数 分类号 Q78
字数 2775字 语种 中文
DOI
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节点文献
热休克蛋白
人热休克蛋白1
鼠热休克蛋白1
基因克隆
原核表达
研究起点
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相关学者/机构
期刊影响力
华北农学报
双月刊
1000-7091
13-1101/S
大16开
石家庄市和平西路598号
18-10
1986
chi
出版文献量(篇)
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