尤文肉瘤EWS-FLI1融合蛋白B淋巴细胞表位的预测及鉴定

• 作者: 刘会文 安洪 廖翔 张战民 曹凯 罗嘉全 舒勇 邓高荣 韩智敏 黄路
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 尤文肉瘤 EWS-FLI1蛋白 融合蛋白 嵌合蛋白 B淋巴细胞表位
• 年，卷（期）: 2011,（12）
• 所属期刊栏目: 肿瘤免疫学
• 页码范围: 1070-1074
• 分类号: R392.2
• 字数: 3895字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-484X.2011.12.004

摘要

目的:预测及鉴定尤文肉瘤EWS-FLI1融合蛋白的B淋巴细胞表位.方法:采用综合法预测EWS-FLI1蛋白的二级结构及B淋巴细胞表位,运用标准Fmoc方案合成预测的表位肽,HPLC和MS进行表位肽的纯度分析及分子量鉴定,ELISA法检测表位肽的抗原性,并测定表位肽特异性免疫血清效价,Western blot鉴定免疫血清与EWS-FLI1蛋白亲合力.结果:通过综合法预测得到3个高分值的B淋巴细胞表位,HPLC分析合成的表位肽纯度>85%,MS鉴定表位肽的分子量无误,ELISA法检测证实3个B淋巴细胞表位肽均可获得强的抗原抗体反应,其中表位肽P2的抗原性最强,在1∶40时A450=2.46,达到最高,1∶10 240稀释后抗原抗体反应仍呈阳性;用这3个B淋巴细胞表位肽免疫新西兰兔也能获得理想的抗体效价,其中表位肽P2获得的抗体效价最高,1∶512 000稀释时A450=1.11;Western blot鉴定表位肽P1、P2免疫血清能够结合EWS-FLI1蛋白.结论:尤文肉瘤EWS-FLI1蛋白的B淋巴细胞表位肽P1、P2具有潜在的抗原性和免疫原性.