C57BL/6J小鼠脂肪组织总RNA提取及周脂素基因的克隆

• 作者: 刘田福 卫兵艳 张引红 郭永昌
• 来源期刊: 中国比较医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: RNA提取 周脂素 RT-PCR 基因克隆 序列分析
• 年，卷（期）: 2011,（8）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 35-39
• 分类号: Q781|R33
• 字数: 3979字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-7856.2011.08.009

摘要

目的 用改进后的方法提取高质量的RNA,以此为模板,应用T-A克隆法克隆C57BL/6J小鼠周脂素基因编码区,对其进行测序验证,并与GenBank比对.方法 在试剂说明书基础上,改进提取脂肪组织RNA的方法,从C57BL/6J附睾脂肪组织提取高质量的总RNA,用RT-PCR扩增出周脂素编码区基因,并将目的基因编码区克隆入pMD18-T载体中,转化E-coli JM109后,筛选阳性克隆,通过限制性内切酶酶切鉴定后,对其进行测序验证,并与GenBank比对.结果 用改进后的方法成功提取出了高质量的总RNA,并且成功提取构建的重组载体中含有周脂素基因的全长序列,与GenBank公布的序列一致.结论 改进的后的脂肪组织RNA提取方法是可行的,并获得周脂素基因的cDNA.为进一步研究其生物学功能奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘田福	山西医科大学实验动物中心	76	395	9.0	16.0
2	张引红	山西医科大学实验动物中心	17	66	4.0	7.0
3	卫兵艳	山西医科大学实验动物中心	11	15	2.0	3.0
4	郭永昌	山西医科大学实验动物中心	8	101	3.0	8.0