免疫PCR检测微量H5亚型禽流感病毒

• 作者: 吴振兴 张彦明 王昌军 王群 肖西志 辛学谦 邓明俊 郑小龙
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 免疫PCR 禽流感病毒 H5血凝素蛋白
• 年，卷（期）: 2011,（7）
• 所属期刊栏目: 研究简报
• 页码范围: 1039-1045
• 分类号: S854.43
• 字数: 5740字
• 语种: 中文

摘要

为了有效检测低浓度禽流感病毒,笔者通过将高特异性的抗原-抗体反应与高灵敏性的PCR扩增技术相结合,建立了一种快速检测痕量H5亚型禽流感病毒的间接免疫PCR方法和间接“三明治”抗体夹心免疫PCR方法.以TopYield 96孔板为固相免疫吸附载体,以禽流感病毒H5蛋白为检测对象,通过一系列免疫反应及亲和素-生物素桥联作用,将生物素标记的报告DNA分子和生物素标记的禽流感病毒H5亚型抗体分子连接.充分洗涤后,在TopYield板孔中添加PCR反应液,对板壁偶联的报告DNA进行PCR扩增,间接达到检测微量禽流感病毒H5蛋白的目标.通过优化报告DNA分子和链亲和素的浓度,2种免疫PCR技术都可检测到约1 fg的禽流感病毒H5蛋白,与常规ELISA方法相比,灵敏性提高了近1 000倍.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张彦明	西北农林科技大学动物医学院	256	1530	16.0	24.0
2	吴振兴		32	151	7.0	10.0
3	郑小龙		45	148	8.0	9.0
4	王群		31	76	4.0	7.0
5	邓明俊	西北农林科技大学动物医学院	36	144	8.0	10.0
7	肖西志	西北农林科技大学动物医学院	22	111	7.0	9.0
9	辛学谦		5	24	3.0	4.0