鸡胚小肠上皮细胞的分离及原代培养研究

• 作者: 刘思国 洪智敏 瞿明仁 贾永杰 黎观红
• 来源期刊: 江西农业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 鸡小肠上皮细胞 分离 原代培养 鸡胚
• 年，卷（期）: 2011,（6）
• 所属期刊栏目: 动物科学与动物医学
• 页码范围: 1164-1170
• 分类号: S831.1
• 字数: 6722字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-2286.2011.06.025

摘要

取18日龄的SPF鸡胚,分别采用组织块培养法、胰蛋白酶、胶原酶Ⅰ和嗜热菌蛋白酶消化法分离和体外培养小肠上皮细胞.结果表明:组织块培养法所获得的上皮细胞纯度较低；胰蛋白酶消化后多为单细胞,细胞贴壁和生长能力较弱；胶原酶Ⅰ单独消化50 min或嗜热菌蛋白酶单独消化110 min以及胶原酶Ⅰ、嗜热菌蛋白酶联合消化后均可得到大量隐窝细胞团块,经低速离心去除单细胞、差速贴壁除去成纤维细胞,可获得较纯的上皮细胞.分离的细胞接种培养12 ～24 h贴壁,48～ 72 h细胞团中的细胞向四周蔓延,形成一群群的细胞集落,6～7d细胞汇合成片,成“铺路石样”,细胞多呈扁平多角状,椭圆状,单层生长,边界清晰,互不重叠.经形态学观察、扫描电镜鉴定、碱性磷酸酶染色和免疫组化鉴定为上皮细胞.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘思国	中国农业科学院哈尔滨兽医研究所	48	547	14.0	22.0