地塞米松对人晶状体上皮细胞核转录因子κB及其抑制蛋白α的表达和细胞凋亡的影响

• 作者: 刘平 王林 王钧蔚 葛红岩
• 来源期刊: 中华实验眼科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 皮质类固醇性白内障 地塞米松 核转录因子κB 核转录因子κB抑制蛋白α 凋亡 人晶状体上皮细胞
• 年，卷（期）: 2011,（2）
• 页码范围: 145-150
• 分类号: R776.01
• 字数: 5343字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.2095-0160.2011.02.012

摘要

背景 长期全身或眼局部应用糖皮质激素可诱导皮质类固醇性白内障,但其作用机制尚不明确.目的 研究地塞米松作用于人晶状体上皮细胞(LECs)后对LECs中核转录因子KB(NF-κB)/NF-KB抑制蛋白α(IκBα)表达的影响及LECs凋亡的发生情况,了解皮质类同醇性白内障的发病机制.方法取人LECs系(HLE2B3)在含质量分数20%胎牛血清的DMEM中进行培养和传代.将不同浓度的地塞米松(0.01、0.1、1、10、100μmol/L)分别加入DMSO无血清DMEM培养液中作为不同浓度地塞米松组,不含地塞米松的DMSO无血清DMEM培养液培养的LECs作为空白对照组.采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)、Western blot、流式细胞术等方法,分别在基因水平、蛋白水平检测LECs中NF-κB/IkBα浓度的改变及LECs凋亡率的变化.结果 扩增的基因片段与所设计片段大小一致.地塞米松作用后NF-kB核蛋白在LECs中的表达量随着地塞米松浓度的增加而下降,差异有统计学意义(F＝36.077,P＝0.004);IκBα蛋白的表达随着地塞米松浓度的增加而上升,差异有统计学意义(F＝35.741,P＝0.002).在同浓度地塞米松组,NF-κB核蛋白在LECs中的表达量随作用时间的不同差异有统计学意义(F＝16.606,P＝0.01),与地塞米松作用24h时的表达量比较,36h和48h时的NF-kB核蛋白表达量明显下降,差异有统计学意义(P＝0.002;P＝0.01).与地塞米松作用24h时的表达量比较,36h和48h IκBα蛋白在LECs中的表达量明显增加,差异均有统计学意义(P＝0.014;P＝0.002).流式细胞仪检测显示LECs的凋亡率随着地塞米松浓度的增加明显上升,与空白对照组相比差异有统计学意义(P<0.05).结论 地塞米松通过七调IκBα的表达而过度抑制了NF-κB的活性,并导致LECs凋亡,其作用呈浓度依赖性,这可能是皮质类固醇性白内障发生发展的细胞学和分子生物学机制之一.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘平		211	863	12.0	19.0
2	葛红岩		37	157	6.0	10.0
3	王林		19	83	5.0	8.0
4	王钧蔚		3	8	2.0	2.0