siRNA靶向抑制GHR对人结肠癌SW480细胞增殖的影响

• 作者: 周东 张毅 曾德妙 李思齐 梁道明 袁勇 陈嘉勇
• 来源期刊: 中国普通外科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 结肠肿瘤 RNA,小分子干扰 受体,人生长激素
• 年，卷（期）: 2011,（9）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 945-950
• 分类号: R735.3
• 语种: 中文

摘要

目的 利用小分子干扰RNA( siRNA)技术抑制人结肠癌SW480细胞人生长激素受体(GHR)基因的表达,观察GHR基因沉默对SW480细胞增殖的影响.方法 设计特异性siRNA,构建针对人GHR真核质粒的表达载体(pcDNATM6.2-GW/EmGFP-siRNA-GHR),用电转染法转染人结肠癌SW480细胞,培养48 ～72 h后,用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞增殖活性；Western Blot检测GHR蛋白表达；实时荧光定量PCR( qPCR)方法检测GHR mRNA水平变化.结果 转染siRNA后,与对照组相比,转染组细胞增殖速率、GHR的蛋白表达量、GHR mRNA水平均明显降低(均P＜0.05).结论 构建的pcDNATM6.2 - GW/EmGFP- GHRsiRNA能有效地下调SW480细胞中GHR的表达,从而抑制SW480细胞的增殖.