琼脂糖凝胶电泳与核酸印迹杂交法检测细菌毒力基因PCR产物的灵敏度比较研究

• 作者: 刘志广 叶长芸 李培京 王涛 綦廷娜
• 来源期刊: 疾病监测
• 学科: 医学
• 关键词: 核酸印迹杂交 琼脂糖凝胶电泳 肠出血性大肠埃希菌0157:H7 猪链球菌2型 stx2基因 cps2J基因 检测灵敏度
• 年，卷（期）: 2011,（8）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 651-653
• 分类号: R378.2+1
• 语种: 中文
• DOI: 10.3784/j.issn.1003-9961.2011.08.020

摘要

目的 探讨核酸印迹杂交法在检测细菌毒力基因方面的应用价值.方法 分别以10倍连续稀释的0157:H7肠出血性大肠埃希菌和血清2型猪链球菌染色体提取物为模板,与志贺毒素2基因(stx2)和荚膜多糖2J基因(cps2J)特异性引物进行聚合酶链式反应(PCR).用1%琼脂糖凝胶电泳及核酸印迹杂交法检测PCR产物,比较两种方法的最低检测限.结果 1%琼脂糖凝胶电泳对EDL933菌株:stx2基因PCR产物的最低检测限为6.7 × 10(2)cfu(56.87 pg)/PCR体系,对SC84菌株cps2J基因PCR产物的最低检测限为4.3 × 10(2)cfu (12.65 pg)/PCR体系;核酸印迹杂交法对EDL933菌株stx2基因PCR产物的最低检测限为6.7 × 10(-1)cfu (56.87 fg)/PCR体系,对SC84菌株cps2J基因PCR产物的最低检测限为4.3 × 10(-1)cfu (12.65 fg)/PCR体系.结论 用核酸印迹杂交法检测肠出血性大肠埃希菌stx2基因和猪链球菌cps2J基因PCR产物的灵敏度均比普通琼脂糖凝胶电泳检测法高了1000倍.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王涛	贵阳医学院微生物学教研室	28	53	5.0	5.0
2	綦廷娜	贵阳医学院微生物学教研室	10	41	5.0	6.0