单纯疱疹病毒Ⅱ型糖蛋白D胞外区片段在哺乳动物细胞中的表达及其免疫活性

• 作者: 李琳 李越希 王正茂 管文燕
• 来源期刊: 中国生物制品学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 单纯疱疹病毒 包膜糖蛋白D 哺乳动物细胞 免疫活性
• 年，卷（期）: 2011,（4）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 384-388
• 分类号: R373.1+1
• 语种: 中文

摘要

目的 在哺乳动物细胞中表达单纯疱疹病毒Ⅱ型(Herpes simplex virus type-2,HSV-2)糖蛋白D(Glycoprotein D,gD)胞外区片段,并分析其免疫活性.方法 化学合成HSV-2G株gD蛋白胞外区片断的基因序列gDt,以pCEP4作为表达载体,构建N-末端带His标签的重组表达质粒pCEP4-gDt,转染至HEK293细胞进行表达.表达的蛋白采用镍离子柱亲和层析纯化,ELISA法检测目的 蛋白的抗原性.以纯化的重组蛋白免疫小鼠制备多抗血清,间接ELISA法检测效价.结果 重组表达质粒经PCR、双酶切和DNA测序证实构建正确;表达产物经Western blot分析,在相对分子质量约46 000处可见目的 蛋白条带;纯化的重组蛋白浓度约为45μg/ml,经ELISA检测证实具有良好的抗原性,免疫小鼠5周后,血清中特异性抗体效价达5×103.结论 已在哺乳动物细胞中表达了HSV-2gD胞外区片段,其具有良好的抗原性和免疫原性,为HSV基因重组亚单位疫苗的研制奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李越希	南京医科大学基础医学院生物化学与分子生物学系	49	295	9.0	14.0
3	李琳	南京医科大学基础医学院生物化学与分子生物学系	40	228	8.0	13.0
4	管文燕	南京医科大学基础医学院生物化学与分子生物学系	4	23	2.0	4.0
5	王正茂	南京医科大学基础医学院生物化学与分子生物学系	2	7	1.0	2.0