SWELL1真核表达载体的构建及其在哺乳动物细胞的表达

• 作者: 丁旭 周雁红 夏忠雪 姜晓明 林小珍 王胜 聂文营 郝峰
• 来源期刊: 中国兽医杂志
• 关键词: SWELL1 FRT细胞 荧光淬灭动力学试验 容积调控性氯离子通道
• 年，卷（期）: 2020,（3）
• 所属期刊栏目: 实验观察
• 页码范围: 49-52,前插4
• 页数: 5页
• 分类号: Q71
• 语种: 中文

摘要

为研究SWELL1容积调控性氯离子通道在多种哺乳动物细胞的表达情况,最终获得表达及功能俱佳的细胞模型.反转录PCR方法从SJSA 1细胞中获得目的基因SWELL1,应用基因同源重组技术将SWELL1克隆入真核表达载体pC-MV3-RFP,测序结果表明,成功构建SWELL1真核表达载体;SWELL1转染至HEK293、CHO和FRT细胞中,抗生素筛选和有限稀释后,获得表达SWELL1细胞株;倒置荧光显微镜观察SWELL1的表达情况,并应用荧光淬灭动力学试验检测SWELL1的离子转运功能.结果 表明FRT细胞为研究SWELL1的最佳细胞模型,SWELL1是容积调控性氯离子通道的分子基础,具有经典容积调控性氯离子通道的特性.