牙龈卟啉单胞菌基因真核表达载体构建及其在哺乳动物细胞中的表达

• 作者: 吴织芬 张凤秋 杨连甲 秦鸿雁
• 来源期刊: 华西口腔医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 牙周炎 牙龈卟啉单胞菌 牙龈蛋白酶K 基因疫苗
• 年，卷（期）: 2004,（6）
• 所属期刊栏目: 专栏论著
• 页码范围: 503-506
• 页数: 4页
• 分类号: R781.4
• 字数: 3275字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-1182.2004.06.018

摘要

目的构建分泌型牙龈卟啉单胞菌牙龈蛋白酶K基因的真核表达载体VR1020/KGPcd,并检测其在哺乳动物细胞中的表达及分泌情况.方法应用基因重组方法,构建真核表达载体VR1020/KGPcd.然后用Lipofectamine2000介导瞬时转染COS7细胞,以反转录聚合酶链反应(RT-PCR)和间接免疫荧光检测重组质粒的基因转录和蛋白表达,酶联免疫吸附实验(ELISA)检测培养上清中蛋白分泌情况.结果转染的COS7细胞中可检测到目的基因的哪转录和表达,并且在培养的上清中检测到其表达的蛋白质.结论成功构建了可分泌表达的真核表达载体VR1020/KGPcd,并在哺乳动物细胞中能够正确转录和翻译,培养上清中可检测到正确表达的目的蛋白,这为其作为基因疫苗免疫动物奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吴织芬	第四军医大学口腔医院牙周科	135	1170	17.0	24.0
2	杨连甲	第四军医大学口腔医院病理科	78	485	10.0	17.0
3	秦鸿雁	第四军医大学医学遗传学与发育生物学教研室	42	148	7.0	9.0
4	张凤秋	第四军医大学口腔医院牙周科	9	148	5.0	9.0