牙龈卟啉单胞菌FimA蛋白和IL-15真核共表达质粒的构建与鉴定

• 作者: 姜广水 杨丕山 王喜军 郭红梅
• 来源期刊: 华西口腔医学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 牙龈卟啉单胞菌 菌毛蛋白A DNA疫苗 转染
• 年，卷（期）: 2006,（3）
• 所属期刊栏目: 专栏论著
• 页码范围: 265-268
• 页数: 4页
• 分类号: Q782
• 字数: 3688字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-1182.2006.03.021

摘要

目的构建含编码牙龈卟啉单胞菌FimA蛋白和IL-15基因的真核共表达质粒,并检测其在哺乳动物细胞中的表达.方法应用基因重组技术,构建真核表达载体pIRES-fimA和真核共表达载体pIRES-fimA:IL15,通过酶切、PCR及DNA序列测定鉴定获得的质粒,用Lipofectamine 2000介导转染CHO细胞,用Western blot检测重组质粒在哺乳动物中的表达,酶联免疫吸附试验检测培养上清中的蛋白表达.结果PCR扩增获得的fimA和IL-15目的基因与预计相同,定向插入真核表达质粒pIRES中,插入位相正确,未改变阅读框架.转染的CHO细胞能够检测到目的基因的表达,在培养上清中也可以检测到蛋白质的表达.结论本实验成功构建了牙龈卟啉单胞菌FimA蛋白和IL-15的真核共表达质粒pIRES-fimA:IL15,为研制增强免疫应答的抗牙龈卟啉单胞菌DNA疫苗奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨丕山	山东大学口腔医院牙周科	120	683	13.0	16.0
2	王喜军		5	13	2.0	3.0
3	郭红梅	山东大学口腔医院牙周科	7	32	3.0	5.0
4	姜广水	山东大学口腔医院牙周科	59	269	8.0	12.0