牙龈卟啉单胞菌菌毛蛋白FimA基因在大肠杆菌中的融合表达和纯化

• 作者: 朱春晖 李昂 梁平 石建峰 苟建重 谢红帼 饶国洲
• 来源期刊: 华西口腔医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 牙龈卟啉单胞菌 菌毛蛋白A 融合表达
• 年，卷（期）: 2010,（3）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 241-245
• 分类号: R786
• 字数: 4122字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-1182.2010.03.004

摘要

目的 克隆牙龈卟啉单胞菌菌毛蛋白FimA基因,构建原核表达载体,诱导其在大肠杆菌中融合表达,并鉴定、纯化其表达产物.方法 克隆牙龈卟啉单胞菌菌毛蛋白FimA基因,构建表达载体pET15b-FimA,转化大肠杆菌BL21(DE3)pLyS感受态细胞;异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达融合蛋白,以抗6×His Tag单克隆抗体为一抗,Western blot鉴定、Co2+柱亲和层析纯化融合蛋白.结果 克隆的FimA基因序列及插入表达载体中的FimA序列均与GenBank数据库中的序列呈现100%同源性;IPTG诱导后Western blot鉴定4.1×104处有目的 蛋白表达;Co2+亲和层析法获得纯化的高浓度FimA蛋白.结论 本实验成功构建了牙龈卟啉单胞菌菌毛蛋白FimA基因的原核表达载体pET15b-FimA,并在大肠杆菌中获得成功表达和纯化,为进一步制备牙龈卟啉单胞菌菌毛蛋白单克隆抗体和研制开发预防牙周炎的亚单位蛋白疫苗奠定了实验基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李昂	西安交通大学附属口腔医院口腔医学研究中心	81	451	12.0	17.0
2	谢红帼	西安交通大学附属口腔医院牙周科	4	19	2.0	4.0
3	苟建重		54	212	8.0	12.0
4	石建峰	西安交通大学附属口腔医院口腔医学研究中心	28	97	6.0	7.0
5	饶国洲	西安交通大学附属口腔医院口腔医学研究中心	64	326	9.0	14.0
6	梁平	西安交通大学附属口腔医院牙周科	5	66	4.0	5.0
7	朱春晖	西安交通大学附属口腔医院牙周科	10	43	4.0	6.0