牙龈卟啉单胞菌精氨酸牙龈素催化结构域基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达

• 作者: 刘蒸 李昂 苟建重 许援朝 许静 谢红帼 饶国洲
• 来源期刊: 华西口腔医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 牙龈卟啉单胞菌 蛋白酶 原核表达
• 年，卷（期）: 2006,（5）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 400-403
• 页数: 4页
• 分类号: R780.2
• 字数: 3545字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-1182.2006.05.004

摘要

目的 克隆牙龈卟啉单胞菌精氨酸牙龈素催化结构域(RgpAcd)基因,并将其置于大肠杆菌中作融合表达.方法 利用PCR技术和基因重组技术,克隆牙龈卟啉单胞菌RgpAcd,然后插入中介载体pMD18-T中并测序鉴定.将目的 基因片段插入原核表达载体pET-15b来构建表达质粒pET-15b/RgpAcd.重组原核表达质粒经酶切鉴定后转化大肠杆菌BL21感受态细胞,以异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达融合蛋白.结果 核酸序列测定与分析的结果表明,克隆的1 476 bp基因序列与GenBank数据库中的序列呈现100%同源性;IPTG诱导后的菌体经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳后有一个相对分子质量为5×104的融合表达蛋白产生.结论 本实验成功克隆了牙龈卟啉单胞菌RgpAcd基因,并在大肠杆菌中表达了RgpAcd蛋白,为进一步研制重组活载体疫苗奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李昂	西安交通大学口腔医院口腔医学研究中心	81	451	12.0	17.0
2	谢红帼	西安交通大学口腔医院口腔内科	4	19	2.0	4.0
3	苟建重	西安交通大学口腔医院口腔内科	54	212	8.0	12.0
4	许静	上海交通大学附属第六人民医院口腔科	17	108	5.0	10.0
5	饶国洲	西安交通大学口腔医院口腔医学研究中心	64	326	9.0	14.0
6	刘蒸	西安交通大学口腔医院口腔内科	13	66	5.0	7.0
7	许援朝	西安交通大学口腔医院口腔医学研究中心	4	18	3.0	4.0