牙龈卟啉单胞菌外膜蛋白3-磷酸甘油醛脱氢酶基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达

• 作者: 徐红艳 朱春晖 李昂 石建峰 苟建重 饶国洲
• 来源期刊: 华西口腔医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 牙龈卟啉单胞菌 3-磷酸甘油醛脱氢酶 原核表达
• 年，卷（期）: 2011,（2）
• 所属期刊栏目: 专栏论著
• 页码范围: 199-202
• 分类号: R786
• 字数: 3613字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-1182.2011.02.025

摘要

目的 克隆牙龈卟啉单胞菌外膜蛋白3-磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH),并将其置于大肠杆菌中作融合表达.方法 利用PCR技术,克隆GAPDH,插入克隆载体pMD18-T中得到克隆重组子pMD18-T-GAPDH.克隆重组子与表达载体pET-32a双酶切后连接构建表达质粒pET-32a-GAPDH.重组原核表达质粒经酶切鉴定后转化大肠杆菌BL21感受态细胞,以不同浓度异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达融合蛋白.结果 核酸序列测定与分析表明:表达重组子pET-32a-GAPDH与NCBI核酸数据库中收录的GAPDH序列同源性达99.802%;在最佳浓度的IPTG诱导下,GAPDH可高效表达.结论 本实验成功克隆了牙龈卟啉单胞茵GAPDH基因,并在大肠杆菌中表达了GAPDH蛋白,为后续实验研究GAPDH的免疫学性能及相应的抗体制备奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李昂	西安交通大学医学院附属口腔医院口腔医学研究中心	81	451	12.0	17.0
2	苟建重	西安交通大学医学院附属口腔医院牙周科	54	212	8.0	12.0
3	石建峰	西安交通大学医学院附属口腔医院口腔医学研究中心	28	97	6.0	7.0
4	饶国洲	西安交通大学医学院附属口腔医院口腔医学研究中心	64	326	9.0	14.0
5	朱春晖	西安交通大学医学院附属口腔医院牙周科	10	43	4.0	6.0
6	徐红艳	西安交通大学医学院附属口腔医院牙周科	1	2	1.0	1.0